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400-021-2021
產品介紹
NR8383 (正常大鼠，1983年)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。隨后，不再需要外源生長因子。通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞，并三次用軟瓊脂亞克隆。細胞表現出巨噬細胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，Fc受體，氧化降解；分泌IL-1, TGF-β和IL-6，可重復地響應外源生長因子。NR8383細胞響應博萊霉素，分泌TGF-β前體。在博萊霉素刺激下，TGF –β mRNA表達也上升。細胞對內毒素敏感。1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達50%。 即使達到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑制還是無毒且在后續過程中可逆的。NR8383細胞株提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源，可以用于體外研究巨響細胞相關活性。
1） 來源：肺；巨噬細胞
2） 形態：巨噬細胞，半懸浮生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。
細胞接收后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3） T25瓶中的培養基取出離心后，去上清，添加6ml新的*培養基，重新加入原T25培養瓶。
4） 如果細胞長滿80-90%請及時進行細胞傳代，傳代培養用本公司附帶的*培養基。
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
細胞用途：僅供科研使用。
細胞培養操作規程，供參考
一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備F-12K培養基；優質胎牛血清（熱滅活），15%；L-谷氨酰胺，2mM；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養瓶中培養，補加培養基至6ml。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 將上清取出保留，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量*培養基終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，和上清一起在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1:5比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。*次傳代為1:2。
下面T25瓶為類；
1，細胞凍存時，取出上清，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml*培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和服務介紹：
一、原代細胞服務：
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務：
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書
細胞系培養過程的技術指導
細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務：
iPS細胞基礎培養（有滋養層or無滋養層）
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術外包服務、客戶定制服務等
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