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說說小鼠小膠質BV2的傳代方法和凍存方法

更新時間:2023-06-16 瀏覽次數:3287

  小鼠小膠質BV2是一個不斷增長和分化的細胞群。由于其遺傳轉化,它具有無限的生長潛力。體外培養的細胞系用于醫學或科學研究。事實上,連續細胞系可以在大量培養基中培養。隨著代數的增加,細胞的基因型和表型可能會發生變化。保證細胞純度在90%以上,并通過微生物檢測,確保不含HIV、HBV、HCV、支原體、真菌等各類細菌。
  如果懸浮物來自血液、羊水、胸水或腹水,簡單的方法是用1000r/min低速離心10分鐘。如果懸浮液體積較大,可適當延長離心時間,但速度不宜過高,延遲不宜過長,以免擠壓或對細胞造成機械損傷。離心沉淀后,用無鈣無鎂PBS洗2次,培養基洗1次,調整合適的細胞濃度后,裝瓶培養。如果選擇懸浮液中的一些細胞,通常使用離心后的細胞分層液,因為由于各種細胞的比重不同,在離心后的分層液中可以形成不同的層,從而可以收獲靶細胞作為需要。
  
  一、小鼠小膠質BV2傳代方法:
  1、輕輕吸去培養上清液,留下2-3ml培養基,輕輕吹打細胞表面,吹掉細胞;
  2、混勻細胞,收集細胞培養基,900rpm離心3-5分鐘,棄上清;
  3、加入新的培養基,輕輕重懸細胞,均勻分布到新的培養瓶中;
  4、補充完整培養基,將培養瓶放回培養箱進行靜態培養。
 
  二、小鼠小膠質BV2凍存方法:
  1、離心得到細胞沉淀后,加入配置好的凍存液,輕輕重懸細胞;
  2、盡快將細胞懸液轉移到標記好的凍存管中;
  3、將凍存管轉移到程序凍存箱中,放入-80℃冰箱過夜,次日轉移到液氮中保存;如果沒有凍存實驗室,可以在加入細胞后5-10分鐘將細胞置于4度的泡沫箱中。然后-20在2h保存,然后轉移到-80度過夜。第二天轉移到液氮中保存。

小鼠小膠質BV2

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